Therese Ann Rutherford nacque il 2 novembre 1917 a Vancouver, in Canada, da John Rutherford, ex tenore d’opera, e da Lucille Mansfield, attrice del cinema muto. Dopo la separazione dei genitori si trasferì con la madre e le sorelle prima a San Francisco e poi a Los Angeles. La sorella maggiore Laurette intraprese anch’essa la carriera cinematografica con il nome di Judith Arlen. Ann frequentò le scuole a Hollywood e iniziò a recitare in programmi radiofonici, ottenendo nel 1935 il primo ruolo cinematografico in Waterfront Lady per Mascot Pictures, poi divenuta Republic Pictures. In breve tempo si affermò come protagonista di western accanto a Gene Autry e John Wayne. Nel 1937 firmò un contratto con la Metro-Goldwyn-Mayer, dove interpretò numerosi ruoli, tra cui lo Spirito del Natale Passato in A Christmas Carol del 1938 e Lydia Bennet in Pride and Prejudice del 1940. Nel 1938 fu prestata alla Selznick International Pictures per impersonare Carreen O’Hara, sorella di Scarlett, in Gone with the Wind del 1939. Dal 1937 al 1942 interpretò Polly Benedict nella serie di commedie di Andy Hardy con Mickey Rooney, consolidando la sua popolarità. Fu anche Carol Lambert, fidanzata di Red Skelton, in tre film della serie Whistling tra il 1941 e il 1943.
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Negli anni Quaranta lasciò la MGM e lavorò come freelance, apparendo in Orchestra Wives (1942), Two O’Clock Courage (1945) e The Secret Life of Walter Mitty (1947). Nel 1950 si ritirò dal cinema, rifiutando di riprendere il ruolo di Polly Benedict nell’ultimo film della serie Andy Hardy del 1958. Tornò brevemente nel 1972 con una parte in They Only Kill Their Masters e nel 1976 con un cameo in Won Ton Ton, the Dog Who Saved Hollywood. Si sposò nel 1942 con David May II, nipote del fondatore dei grandi magazzini May Company, da cui ebbe una figlia, Gloria May Voeller; il matrimonio terminò con il divorzio nel 1953. Nello stesso anno sposò l’attore e produttore William Dozier, creatore della serie televisiva Batman, con cui rimase fino alla morte di lui nel 1991. Dal 1992 visse con il compagno Al Morley. Nel corso della carriera recitò in oltre cinquanta film, tra cui The Bride Wore Red, Of Human Hearts, Judge Hardy’s Children, Love Finds Andy Hardy, The Hardys Ride High, Andy Hardy Meets Debutante, Washington Melodrama, Life Begins for Andy Hardy, Badlands of Dakota, This Time for Keeps, Happy Land, Bermuda Mystery, Bedside Manner, The Madonna’s Secret, Murder in the Music Hall, Inside Job, Adventures of Don Juan e Operation Haylift. Morì l’11 giugno 2012 nella sua casa di Beverly Hills, California, all’età di 94 anni, a causa di problemi cardiaci, e fu cremata con le ceneri affidate alla figlia.
